AbstraktníExperiment byl proveden za účelem studia vlivu diludinu na snášku a kvalitu vajec u slepic a přístupu k mechanismu těchto účinků stanovením indexů parametrů vajec a séra. 1024 slepic ROM bylo rozděleno do čtyř skupin, z nichž každá zahrnovala čtyři replikáty po 64 slepicích. Experimentované skupiny dostávaly stejnou základní dietu doplněnou o 0, 100, 150 a 200 mg/kg diludinu po dobu 80 dnů. Výsledky byly následující. Přidání diludinu do diety zlepšilo snášku slepic, přičemž nejlepší byla dávka 150 mg/kg; míra snášky se zvýšila o 11,8 % (p < 0,01), konverze hmotnosti vajec se snížila o 10,36 % (p < 0,01). Hmotnost vajec se zvyšovala se zvyšujícím se množstvím přidaného diludinu. Diludin významně snížil sérovou koncentraci kyseliny močové (p < 0,01); přidání diludinu významně snížilo sérový vápník.2+a obsah anorganických fosfátů a zvýšená aktivita alkinové fosfatázy (ALP) v séru (p< 0,05), takže měl významný vliv na snížení lámání vajec (p< 0,05) a abnormalit (p< 0,05); diludin významně zvýšil výšku bílku. Haughova hodnota (p< 0,01), tloušťka a hmotnost skořápky (p< 0,05), 150 a 200 mg/kg diludinu také snížilo celkový cholesterol ve žloutku (p< 0,05), ale zvýšilo hmotnost žloutku (p< 0,05). Kromě toho mohl diludin zvýšit aktivitu lipázy (p< 0,01) a snížit obsah triglyceridů (TG3) (p< 0,01) a cholesterolu (CHL) (p< 0,01) v séru, snížil procento břišního tuku (p< 0,01) a obsah tuku v játrech (p< 0,01) a měl schopnost předcházet ztučnění jater u slepic. Diludin významně zvýšil aktivitu SOD v séru (p < 0,01), pokud byl přidán do stravy na dobu delší než 30 dní. Nebyl však zjištěn žádný významný rozdíl v aktivitě GPT a GOT v séru mezi kontrolní a léčenou skupinou. Bylo zjištěno, že diludin může zabránit oxidaci buněčných membrán.
Klíčová slovaDiludin; slepice; SOD; cholesterol; triglyceridy, lipáza
Diludin je nová nenutriční antioxidační vitamínová přísada s těmito účinky...[1–3]omezování oxidace biologické membrány a stabilizaci tkáně biologických buněk atd. V 70. letech 20. století zjistil zemědělský expert z Lotyšska v bývalém Sovětském svazu, že diludin má účinky[4]podporuje růst drůbeže a u některých rostlin odolává mrazu a stárnutí. Bylo hlášeno, že diludin nejenže dokáže podpořit růst zvířat, ale také zlepšit reprodukční výkonnost zvířat a zvýšit míru březosti, produkci mléka, produkci vajec a líhnutí samic.[1, 2, 5–7]Studie diludinu v Číně začala v 80. letech 20. století a většina studií o diludinu v Číně se dosud omezuje na jeho účinek a bylo publikováno jen několik studií na nosnicích. Chen Jufang (1993) uvedl, že diludin může zlepšit snášku a hmotnost vajec drůbeže, ale neprohloubil to.[5]studium mechanismu jeho účinku. Proto jsme provedli systematickou studii jeho účinku a mechanismu krmením nosnic krmivem dopovaným diludinem a část výsledků je nyní uvedena následovně:
Tabulka 1 Složení a nutriční složky experimentální stravy
%
----------------------------------------------------------------------------------------------
Složení stravy Živinové složky
----------------------------------------------------------------------------------------------
Kukuřice 62 ME③ 11,97
Fazolová dřeň 20 CP 17,8
Rybí moučka 3 Ca 3,42
Řepkový šrot 5 P 0,75
Kostní moučka 2 M a 0,43
Kamenná moučka 7,5 M a Cys 0,75
Methionin 0,1
Sůl 0,3
Multivitamin① 10
Stopové prvky② 0,1
---------------------------------------------------------------------------------------------------------
① Multivitamin: 11 mg riboflavinu, 26 mg kyseliny listové, 44 mg oryzaninu, 66 mg niacinu, 0,22 mg biotinu, 66 mg vitamínu B6, 17,6 µg vitamínu B12, 880 mg cholinu, 30 mg viklobenu, 66 IU vitamínu VE6600 JIP od VDa 20 000 JIP z VA, se přidávají do každého kilogramu stravy; a 10 g multivitaminu se přidává do každých 50 kg stravy.
② Stopové prvky (mg/kg): Na každý kilogram krmiva se přidává 60 mg Mn, 60 mg Zn, 80 mg Fe, 10 mg Cu, 0,35 mg I a 0,3 mg Se.
③ Jednotka metabolizovatelné energie se vztahuje na MJ/kg.
1. Materiály a metoda
1.1 Zkušební materiál
Společnost Beijing Sunpu Biochem. & Tech. Co., Ltd. by měla nabízet diludin; a testovaným zvířetem by měly být římské komerční nosnice staré 300 dní.
Experimentální dieta: testovací experimentální dieta by měla být připravena podle skutečných podmínek během výroby na základě standardu NRC, jak je uvedeno v tabulce 1.
1.2 Zkušební metoda
1.2.1 Krmný experiment: Krmný experiment by měl být proveden na farmě společnosti Hongji ve městě Jiande; mělo by být vybráno 1024 nosnic plemene Roman a rozděleno do čtyř skupin po 256 kusech (každá skupina by měla být opakována čtyřikrát a každá slepice by měla být opakována 64krát); slepice by měly být krmeny čtyřmi druhy krmiv s různým obsahem diludinu a pro každou skupinu by mělo být přidáno 0, 100, 150, 200 mg/kg krmiva. Test byl zahájen 10. dubna 1997; slepice si mohly volně najít potravu a napít se. Měla by být zaznamenána potrava přijatá každou skupinou, snáška vajec, snáška vajec, počet rozbitých vajec a počet abnormálních vajec. Test byl dále ukončen 30. června 1997.
1.2.2 Měření kvality vajec: Během testu by mělo být náhodně odebráno 20 vajec každé čtyři 40 dní, aby se změřily ukazatele související s kvalitou vajec, jako je index tvaru vejce, Haughova jednotka, relativní hmotnost skořápky, tloušťka skořápky, index žloutku, relativní hmotnost žloutku atd. Obsah cholesterolu ve žloutku by měl být dále měřen metodou COD-PAP za přítomnosti činidla Cicheng vyrobeného společností Ningbo Cixi Biochemical Test Plant.
1.2.3 Měření biochemického indexu séra: Z každé skupiny by mělo být odebráno 16 testovaných slepic po dobu 30 dnů od provedení testu a po jeho ukončení pro přípravu séra po odběru krve z žíly na křídle. Sérum by mělo být skladováno při nízké teplotě (-20 °C), aby bylo možné měřit relevantní biochemické indexy. Po porážce a odstranění břišního tuku a jater by se po dokončení odběru krve mělo měřit procento břišního tuku a obsah lipidů v játrech.
Superoxiddismutáza (SOD) by se měla měřit saturační metodou za přítomnosti reagenční soupravy vyrobené Beijingským výzkumným ústavem Huaqing Biochem. & Tech. Research Institute. Kyselina močová (UN) v séru by se měla měřit metodou U rikáza-PAP za přítomnosti reagenční soupravy Cicheng; triglyceridy (TG3) by se měly měřit jednokrokovou metodou GPO-PAP za přítomnosti reagenční soupravy Cicheng; lipáza by se měla měřit nefelometricky za přítomnosti reagenční soupravy Cicheng; celkový cholesterol v séru (CHL) by se měl měřit metodou COD-PAP za přítomnosti reagenční soupravy Cicheng; glutamát-pyruvátová transamináza (GPT) by se měla měřit kolorimetricky za přítomnosti reagenční soupravy Cicheng; glutamát-oxalacetátová transamináza (GOT) by se měla měřit kolorimetricky za přítomnosti reagenční soupravy Cicheng. Alkalická fosfatáza (ALP) by se měla měřit rychlostní metodou za přítomnosti soupravy s činidlem Cicheng; vápenatý iont (Ca2+) v séru by se měl měřit metodou s methylthymolovou modří a komplexonem za přítomnosti reagenční soupravy Cicheng; anorganický fosfor (P) by se měl měřit metodou s molybdenanovou modří za přítomnosti reagenční soupravy Cicheng.
2 Výsledek testu
2.1 Vliv na výkonnost pokládky
Výkonnost snášek různých skupin ošetřených diludinem je uvedena v tabulce 2.
Tabulka 2 Výkonnost slepic krmených bazální dietou s přídavkem diludinu ve čtyřech úrovních
| Množství diludinu, které se má přidat (mg/kg) | ||||
| 0 | 100 | 150 | 200 | |
| Příjem krmiva (g) |  | |||
| Míra snášky (%) | ||||
| Průměrná hmotnost vejce (g) | ||||
| Poměr materiálu k vejci | ||||
| Míra rozbitých vajec (%) | ||||
| Míra abnormálních vajíček (%) | ||||
Z tabulky 2 vyplývá, že snáška vajec u všech skupin ošetřených diludinem se zřetelně zlepšila, přičemž optimální účinek byl dosažen při dávce 150 mg/kg (až 83,36 %) a ve srovnání s referenční skupinou se zvýšila o 11,03 % (p<0,01); diludin tedy zlepšuje snášku vajec. Z průměrné hmotnosti vajec vyplývá, že se hmotnost vejce zvyšuje (p>0,05) se zvyšujícím se denním příjmem diludinu. Ve srovnání s referenční skupinou není rozdíl mezi všemi zpracovanými částmi skupin ošetřených 200 mg/kg diludinu zřejmý, pokud je průměrně přidáno 1,79 g krmiva; Rozdíl se však postupně s rostoucím diludinem stává zřetelnějším a rozdíl v poměru materiálu k vejci mezi zpracovanými částmi je zřejmý (p<0,05). Optimální účinek je při dávce 150 mg/kg diludinu a činí 1,25:1, což je o 10,36 % (p<0,01) méně než u referenční skupiny. Z míry rozbitých vajec u všech zpracovaných částí vyplývá, že míra rozbitých vajec (p<0,05) se může snížit přidáním diludinu do denní stravy; a procento abnormálních vajec se snižuje (p<0,05) se zvyšujícím se diludinem.
2.2 Vliv na kvalitu vajec
Z tabulky 3 vyplývá, že index tvaru vejce a měrná hmotnost vejce nejsou ovlivněny (p>0,05) přidáním diludinu do denní stravy a hmotnost skořápky se zvyšuje se zvyšujícím se diludinem přidávaným do denní stravy, přičemž hmotnost skořápek se zvyšuje o 10,58 % a 10,85 % (p<0,05) ve srovnání s referenčními skupinami při přidání 150 a 200 mg/kg diludinu; tloušťka skořápky se zvyšuje se zvyšujícím se diludinem v denní stravě, přičemž tloušťka skořápky se zvyšuje o 13,89 % (p<0,05) při přidání 100 mg/kg diludinu ve srovnání s referenčními skupinami a tloušťka skořápek se zvyšuje o 19,44 % (p<0,01) a 27,7 % (p<0,01) při přidání 150 a 200 mg/kg. Haughova jednotka (p<0,01) se zřetelně zlepšuje po přidání diludinu, což naznačuje, že diludin má účinek na podporu syntézy hustého bílku vaječného bílku. Diludin má funkci zlepšení indexu žloutku, ale rozdíl není zřejmý (p<0,05). Obsah cholesterolu ve žloutku všech skupin se liší a může být zřetelně snížen (p<0,05) po přidání 150 a 200 mg/kg diludinu. Relativní hmotnosti žloutku se od sebe liší v důsledku různého množství přidaného diludinu, přičemž relativní hmotnosti žloutku se zlepšily o 18,01 % a 14,92 % (p<0,05) při 150 mg/kg a 200 mg/kg ve srovnání s referenční skupinou; proto má vhodný diludin účinek na podporu syntézy žloutku.
Tabulka 3 Vliv diludinu na kvalitu vajec
| Množství diludinu, které se má přidat (mg/kg) | ||||
| Kvalita vajec | 0 | 100 | 150 | 200 |
| Index tvaru vejce (%) |  | |||
| Měrná hmotnost vajec (g/cm3) | ||||
| Relativní hmotnost vaječné skořápky (%) | ||||
| Tloušťka vaječné skořápky (mm) | ||||
| Haughova jednotka (U) | ||||
| Index vaječného žloutku (%) | ||||
| Cholesterol ve vaječném žloutku (%) | ||||
| Relativní hmotnost vaječného žloutku (%) | ||||
2.3 Vliv na procento břišního tuku a obsah jaterního tuku u nosnic
Viz obrázek 1 a obrázek 2, kde jsou znázorněny účinky diludinu na procento břišního tuku a obsah jaterního tuku u nosnic.
Obrázek 1 Vliv diludinu na procento břišního tuku (PAF) nosnic
| Procento břišního tuku | |
| Množství diludinu, které má být přidáno |
Obrázek 2 Vliv diludinu na obsah tuku v játrech (LF) nosnic
| Obsah tuku v játrech | |
| Množství diludinu, které má být přidáno |
Z obrázku 1 je patrné, že procento břišního tuku v testované skupině se snížilo o 8,3 %, respektive 12,11 % (p<0,05) při podávání 100 a 150 mg/kg diludinu ve srovnání s referenční skupinou a procento břišního tuku se snížilo o 33,49 % (p<0,01) při podávání 200 mg/kg diludinu. Z obrázku 2 je patrné, že obsah tuku v játrech (v absolutně suchém stavu) zpracovaných 100, 150 a 200 mg/kg diludinu se snížil o 15,00 % (p<0,05), 15,62 % (p<0,05) a 27,7 % (p<0,01) ve srovnání s referenční skupinou. Diludin má tedy zjevně účinek na snížení procenta břišního tuku a obsahu tuku v játrech nosnice, přičemž optimální účinek je dosažen při přidání 200 mg/kg diludinu.
2.4 Vliv na biochemický index séra
Z tabulky 4 je patrné, že rozdíl mezi částmi zpracovanými během fáze I (30d) testu SOD není zřejmý a biochemické indexy séra všech skupin, kterým byl diludin přidán ve fázi II (80d) testu, jsou vyšší než u referenční skupiny (p<0,05). Hladina kyseliny močové (p<0,05) v séru může být snížena přidáním 150 mg/kg a 200 mg/kg diludinu; účinek (p<0,05) je patrný při přidání 100 mg/kg diludinu ve fázi I. Diludin může snížit triglyceridy v séru, přičemž účinek je optimální (p<0,01) ve skupině s přidáním 150 mg/kg diludinu ve fázi I a optimální je ve skupině s přidáním 200 mg/kg diludinu ve fázi II. Celkový cholesterol v séru se snižuje se zvyšujícím se množstvím diludinu přidávaného do denní stravy, konkrétněji se obsah celkového cholesterolu v séru snižuje o 36,36 % (p<0,01) a 40,74 % (p<0,01) při přidání 150 mg/kg a 200 mg/kg diludinu ve fázi I ve srovnání s referenční skupinou a snižuje se o 26,60 % (p<0,01), 37,40 % (p<0,01) a 46,66 % (p<0,01) při přidání 100 mg/kg, 150 mg/kg a 200 mg/kg diludinu ve fázi II ve srovnání s referenční skupinou. Navíc se ALP zvyšuje se zvyšujícím se diludinem přidávaným do denní stravy, zatímco hodnoty ALP ve skupině, které bylo přidáno 150 mg/kg a 200 mg/kg diludinu, jsou zjevně vyšší než v referenční skupině (p<0,05).
Tabulka 4 Vliv diludinu na sérové parametry
| Množství diludinu, které se má přidat (mg/kg) ve fázi I (30 dní) testu | ||||
| Položka | 0 | 100 | 150 | 200 |
| Superoxiddismutáza (mg/ml) |  | |||
| Kyselina močová | ||||
| Triglyceridy (mmol/l) | ||||
| Lipáza (U/L) | ||||
| Cholesterol (mg/dl) | ||||
| Glutamátpyruvátová transamináza (U/L) | ||||
| Glutamová-oxalacetátová transamináza (U/L) | ||||
| Alkalická fosfatáza (mmol/l) | ||||
| Vápenatý iont (mmol/l) | ||||
| Anorganický fosfor (mg/dL) | ||||
| Množství diludinu, které se má přidat (mg/kg) ve fázi II (80 dní) testu | ||||
| Položka | 0 | 100 | 150 | 200 |
| Superoxiddismutáza (mg/ml) |  | |||
| Kyselina močová | ||||
| Triglyceridy (mmol/l) | ||||
| Lipáza (U/L) | ||||
| Cholesterol (mg/dl) | ||||
| Glutamátpyruvátová transamináza (U/L) | ||||
| Glutamová-oxalacetátová transamináza (U/L) | ||||
| Alkalická fosfatáza (mmol/l) | ||||
| Vápenatý iont (mmol/l) | ||||
| Anorganický fosfor (mg/dL) | ||||
3 Analýza a diskuse
3.1 Diludin v testu zlepšil snášku, hmotnost vajec, Haughovu jednotku a relativní hmotnost žloutku, což naznačuje, že diludin má účinky na podporu asimilace bílkovin a zlepšení množství syntézy hustého bílku vaječného bílku a bílkovin vaječného žloutku. Dále se zřetelně snížil obsah kyseliny močové v séru; a obecně se uznává, že snížení obsahu neproteinového dusíku v séru znamená snížení rychlosti katabolismu bílkovin a prodloužení doby retence dusíku. Tento výsledek poskytl základ pro zvýšení retence bílkovin, podporu snášky vajec a zlepšení hmotnosti vajec nosnic. Výsledek testu ukázal, že snáška je optimální při přidání 150 mg/kg diludinu, což bylo v podstatě v souladu s výsledkem.[6,7]Bao Erqinga a Qin Shangzhiho a získaný přidáním diludinu v pozdním období nosnic. Účinek se snížil, když množství diludinu překročilo 150 mg/kg, což může být způsobeno transformací bílkovin[8]byl ovlivněn nadměrným dávkováním a nadměrnou metabolickou zátěží orgánu diludinem.
3.2 Koncentrace Ca2+v séru snášecích vajec byla snížena, P v séru byla na začátku snížena a aktivita ALP byla zjevně zvýšena v přítomnosti diludinu, což naznačuje, že diludin zjevně ovlivňuje metabolismus Ca a P. Yue Wenbin uvedl, že diludin může podporovat absorpci.[9] minerálních prvků Fe a Zn; ALP se vyskytovala hlavně v tkáních, jako jsou játra, kosti, střevní trakt, ledviny atd.; ALP v séru pocházela hlavně z jater a kostí; ALP v kostech se vyskytovala hlavně v osteoblastech a po transformaci mohla vázat fosfátový ion s Ca2 ze séra podporou rozkladu fosfátu a zvýšením koncentrace fosfátového iontu a ukládala se na kosti ve formě hydroxyapatitu atd., což vedlo ke snížení Ca a P v séru, což je v souladu se zvyšující se tloušťkou skořápky a relativní hmotností skořápky v ukazatelích kvality vajec. Navíc se z hlediska snášky zjevně snížila míra rozbitých vajec a procento abnormálních vajec, což také vysvětluje tento bod.
3.3 Ukládání břišního tuku a obsah tuku v játrech nosnic se zřetelně snížilo přidáním diludinu do krmné dávky, což naznačuje, že diludin má účinek omezující syntézu tuku v těle. Diludin dále dokázal v rané fázi zlepšit aktivitu lipázy v séru; aktivita lipázy se zřetelně zvýšila ve skupině, které bylo přidáno 100 mg/kg diludinu, a obsah triglyceridů a cholesterolu v séru se snížil (p<0,01), což naznačuje, že diludin může podporovat rozklad triglyceridů a omezovat syntézu cholesterolu. Ukládání tuku se podařilo omezit díky enzymům metabolismu lipidů v játrech.[10,11], a snížení cholesterolu ve vaječném žloutku také vysvětlilo tento bod [13]. Chen Jufang uvedl, že diludin může omezit tvorbu tuku u zvířat a zlepšit procento libového masa u brojlerů a prasat a má účinek na léčbu ztučnění jater. Výsledky testu objasnily tento mechanismus účinku a výsledky pitvy a pozorování testovaných slepic také prokázaly, že diludin může zjevně snížit výskyt ztučnění jater u nosnic.
3.4 GPT a GOT jsou dva důležité ukazatele odrážející funkce jater a srdce a játra a srdce mohou být poškozeny, pokud je jejich aktivita příliš vysoká. Aktivita GPT a GOT v séru se po přidání diludinu do testu zřetelně nezměnila, což naznačuje, že játra a srdce nebyly poškozeny; dále výsledek měření SOD ukázal, že aktivita SOD v séru se mohla zřetelně zlepšit, pokud byl diludin používán po určitou dobu. SOD označuje hlavní lapač volných superoxidových radikálů v těle; je důležitý pro udržení integrity biologické membrány, zlepšení imunitních schopností organismu a udržení zdraví zvířete, pokud je obsah SOD v těle zvýšený. Quh Hai atd. uvádějí, že diludin může zlepšit aktivitu 6-glukózafosfátdehydrogenázy v biologické membráně a stabilizovat tkáně [2] biologické buňky. Sniedze po studiu vztahu mezi diludinem a relevantním enzymem ve specifickém řetězci přenosu elektronů NADPH v mikrozomech jater potkanů zjevně poukázal na to, že diludin omezuje aktivitu [4] NADPH cytochromu C reduktázy. Odydents také poukázal na to, že diludin souvisí [4] se systémem kompozitní oxidázy a mikrozomálním enzymem souvisejícím s NADPH; a mechanismus účinku diludinu po vstupu do zvířete spočívá v roli odolávání oxidaci a ochraně biologické membrány [8] tím, že zachycuje aktivitu enzymu přenosu elektronů NADPH v mikrozomech a omezuje proces peroxidace lipidové sloučeniny. Výsledky testu prokázaly ochrannou funkci diludinu vůči biologické membráně před změnami aktivity SOD a změnami aktivity GPT a GOT a potvrdily výsledky studie Sniedzeho a Odydentse.
Odkaz
1 Zhou Kai, Zhou Mingjie, Qin Zhongzhi atd. Studie o diludinu pro zlepšení reprodukční výkonnosti ovcíJ. Tráva aLivestock 1994 (2): 16–17
2 Qu Hai, Lv Ye, Wang Baosheng, Vliv diludinu přidaného do denní stravy na míru březosti a kvalitu spermatu u králíčího masa.J. Čínský časopis o chovu králíků1994(6): 6–7
3 Chen Jufang, Yin Yuejin, Liu Wanhan atd. Test rozšířené aplikace diludinu jako krmné přísadyVýzkum krmiv1993 (3): 2–4
4 Zheng Xiaozhong, Li Kelu, Yue Wenbin atd. Diskuse o aplikačním účinku a mechanismu účinku diludinu jako stimulátoru růstu drůbežeVýzkum krmiv1995 (7): 12–13
5 Chen Jufang, Yin Yuejin, Liu Wanhan atd. Test rozšířené aplikace diludinu jako krmné přísadyVýzkum krmiv1993 (3): 2–5
6 Bao Erqing, Gao Baohua, Test diludinu pro krmení plemene pekingská kachnaVýzkum krmiv1992 (7): 7–8
7 Qin Shangzhi Test zlepšení produktivity masných slepic v pozdním období snášky pomocí diludinuČasopis pro chov zvířat a veterinární medicínu v Guangxi1993.9(2): 26–27
8 Dibner J Jl Lvey FJ Jaterní proteiny a metabolismus aminokyselin u drůbeže Drůbeží věda1990.69(7): 1188–1194
9 Yue Wenbin, Zhang Jianhong, Zhao Peie atd. Studie přidávání diludinu a přípravku Fe-Zn do denního jídelníčku nosnicKrmivo a hospodářská zvířata1997, 18(7): 29–30
10 Mildner A na M, Steven D Clarke, Klonování komplementární DNA pomocí syntázy mastných kyselin vepřů, tkáňová distribuce její mRNA a potlačení exprese somatotropinem a dietními bílkovinami, J Nutri 1991, 121 900
11 Walzon RL, Smon C, Morishita T a další I. Syndrom hemoragické tukové tkáně jater u slepic překrmovaných čištěnou stravou. Vybrané enzymatické aktivity a histologie jater ve vztahu k honorágii jater a reprodukčnímu výkonu.Drůbeží věda,1993 72(8): 1479–1491
12 Donaldson WE Metabolismus lipidů v játrech kuřat v reakci na krmeníDrůbeží věda1990, 69(7): 1183–1187
13 Ksiazk ieu icz J., K ontecka H, H ogcw sk i L Poznámka k hladině cholesterolu v krvi jako indikátoru tělesné tučnosti u kachenČasopis pro aninal a krmivářskou vědu,1992, 1(3/4): 289–294
Čas zveřejnění: 7. června 2021
